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PCR實(shí)驗(yàn)室的空氣流向管理與環(huán)境消毒?

更新時(shí)間:2022-05-18  |  點(diǎn)擊率:1122

前文提到,PCR實(shí)驗(yàn)室可分為試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物檢測(cè)區(qū)四個(gè)區(qū)域,這四個(gè)區(qū)域在物理空間上必須*相互獨(dú)立,各區(qū)域無(wú)論是在空間上還是在使用中,應(yīng)當(dāng)始終處于*的分隔狀態(tài),不能有空氣的直接相通。

所以,臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的空氣流向應(yīng)按:試劑準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→產(chǎn)物檢測(cè)區(qū),應(yīng)時(shí)刻防止擴(kuò)增產(chǎn)物順空氣氣流進(jìn)入擴(kuò)增前區(qū)域。可按照上述順序區(qū)域空氣壓力遞減的方式進(jìn)行,也可通過(guò)安裝排風(fēng)扇、負(fù)壓排風(fēng)裝置或其他可行方式實(shí)現(xiàn)。

臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境清潔:《臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范》中有對(duì)物表清潔、消毒的要求,不同的實(shí)驗(yàn)區(qū)域應(yīng)當(dāng)有其各自的清潔用具以防止交叉污染。

基本原則:由清潔區(qū)向污染區(qū)進(jìn)行,潔具不可交叉。

清潔消毒方向:準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→產(chǎn)物檢測(cè)區(qū)

清潔消毒范圍:工作區(qū)域的物體表面(含桌、椅),可使用含氯消毒劑擦拭消毒,空氣和工作臺(tái)面可使用紫外線照射消毒,也可使用空間消毒器進(jìn)行全環(huán)節(jié)消毒。

不可使用紫外線消毒器及化學(xué)消毒進(jìn)行有人狀態(tài)下的消毒。

PCR室內(nèi)的消毒應(yīng)防止揚(yáng)塵(減少人員走動(dòng))、殺滅DNA或RNA的基因片段??蛇x擇懸掛紫外線燈管進(jìn)行空氣消毒,試驗(yàn)前照射30-60分鐘,實(shí)驗(yàn)結(jié)束照射30-60分鐘,必要時(shí)延長(zhǎng)照射時(shí)間(可照射一夜)。

終末消毒:當(dāng)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室污染時(shí),應(yīng)按要求立即撤出相關(guān)人員,在無(wú)人情況下可使用化學(xué)消毒劑進(jìn)行終末消毒,如熏蒸法:過(guò)氧乙酸1g/ m⊃3;加熱熏蒸(濕度70-90%),密閉24小時(shí);氣溶膠噴霧:3%過(guò)氧化氫:20mL/m⊃3;氣溶膠噴霧;5%過(guò)氧乙酸2.5mL/m⊃3;氣溶膠噴霧(濕度20-40%)。

處理細(xì)胞培養(yǎng)工作區(qū)域的支原體

 

這里的工作區(qū)域包括實(shí)驗(yàn)臺(tái)、超凈臺(tái)、培養(yǎng)箱(水槽除外)、液氮罐、移液器、門把手等細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境。

使用德國(guó)MB公司生產(chǎn)的支原體祛除噴霧或濕巾(品名:Mycoplasma-off™),可在5-10分鐘清除支原體,高效快速,操作方便。

 

產(chǎn)品特點(diǎn)及原理:

1)快速有效

噴霧劑和濕巾中含有支原體專用殺除劑Mynox®,可在幾分鐘內(nèi)迅速殺除支原體。

與傳統(tǒng)的化學(xué)試劑熏蒸方法相比,更加安全;與傳統(tǒng)酒精處理、紫外線照射方法相比更有效!

2)廣譜抗菌

不僅能去除支原體,而且能有效祛除葡萄球菌、腸球菌、大腸桿菌、奇異變形桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、牛腹瀉病毒、腺病毒、多瘤病毒、諾如病毒、牛痘病毒、真菌孢子等。

3)無(wú)腐蝕性和致癌性

乙醇作為溶劑,無(wú)腐蝕性和致癌性成分。

4)操作簡(jiǎn)便

即用型消毒液,可以快速簡(jiǎn)單地保持工作區(qū)的清潔干凈。

 

使用方法及步驟:

PCR實(shí)驗(yàn)室的空氣流向管理與環(huán)境消毒?

 

噴霧劑:

注:對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)箱,內(nèi)部噴灑支原體祛除噴霧或用濕巾擦拭后,應(yīng)打開(kāi)箱門通風(fēng)至少1小時(shí)。如培養(yǎng)箱帶熱滅活功能,可開(kāi)啟該功能以替代風(fēng)干。

PCR實(shí)驗(yàn)室的空氣流向管理與環(huán)境消毒?

 

濕巾:

對(duì)于移液器,門把手,電子設(shè)備等,可使用支原體祛除濕巾。擦拭后,應(yīng)讓其被消毒物體的表面保持濕潤(rùn),再讓其自然風(fēng)干。

 

培養(yǎng)箱水槽和水浴鍋中預(yù)防支原體污染的方法

 

細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中,培養(yǎng)箱水槽、水浴鍋經(jīng)常會(huì)有支原體以及各種細(xì)菌、霉菌滋生,稍有不慎或清洗不及時(shí),水槽中的水源即會(huì)成為細(xì)胞污染的重要來(lái)源。

 

保持水槽的潔凈,對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的順利進(jìn)行非常重要。

 

推薦眾多實(shí)驗(yàn)室日常都在使用德國(guó)MB公司生產(chǎn)的Water Shield支原體污染防護(hù)劑(水槽用)。Water Shield可持續(xù)作用四周,使水源避免受到支原體、細(xì)菌、酵母、霉菌和孢子的污染。

 

產(chǎn)品特點(diǎn):

1)長(zhǎng)效。Water Shield含表面活性劑、季銨鹽和絡(luò)合劑,不易揮發(fā),可持續(xù)作用4周。

2)安全。不含醛類或疊氮化物,對(duì)細(xì)胞無(wú)毒害。

3)廣譜。預(yù)防支原體、細(xì)菌、酵母菌、霉菌和孢子污染。

4)方便。Water Shield按1:200比例,直接加入水中,使用方便。

5)不產(chǎn)生水垢。

 

操作步驟:

1)Water Shield和蒸餾水可直接加入培養(yǎng)箱水槽或水浴鍋中。

2)Water Shield按1:200比例使用,例如:1000ml蒸餾水+5ml Water Shield,或10L蒸餾水+50ml Water Shield。

3)4周左右清洗水槽,換水,重新加入Water Shield。

PCR實(shí)驗(yàn)室的空氣流向管理與環(huán)境消毒?

 

注意事項(xiàng):

避免吸入。眼睛接觸或長(zhǎng)時(shí)間皮膚接觸可能會(huì)產(chǎn)生刺激性。因而,使用試劑時(shí)應(yīng)戴上護(hù)目鏡和一次性手套。一旦皮膚接觸,應(yīng)用大量水沖洗。

Water Shield對(duì)玻璃、陶瓷、塑料、橡膠、鋼制品、貴金屬和其他金屬安全性良好。