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超級耐藥菌不動桿菌的一種分離方法

更新時間:2018-08-02  |  點擊率:1330

不動桿菌是一類不發(fā)酵糖類的革蘭氏陰性桿菌,不動桿菌屬(Acinetobacter)分為7種,即醋酸鈣不動桿菌(A. calcoaceticus)、魯菲不動桿菌(A. lwoffi)、鮑曼不動桿菌(A. baumanii)、溶血不動桿菌(A. haemolytius)、瓊氏不動桿菌(A. junii)、*不動桿菌(A. johnsonii)和抗輻射不動桿菌。

 

不動桿菌主要存在于各類型的感染中,對大多數(shù)常用的抗生素都有耐藥性,包括β內(nèi)酰胺類和氨基糖甙類。不動桿菌是條件致病菌,也是人體正常菌群的組成部分。該菌粘附力*,易在各類醫(yī)用材料上粘附,而成為貯菌源。存在于健康人皮膚(25%)、咽部(7%),也存在于結(jié)膜、唾液、胃腸道及陰道分泌物中。感染源可以是患者自身(內(nèi)源性感染),亦可以是不動桿菌感染者或帶菌者,尤其是雙手帶菌的醫(yī)務(wù)人員。傳播途徑有接觸傳播和空氣傳播。在醫(yī)院里,污染的醫(yī)療器械及工作人員的手是重要的傳播媒介。易感者為老年患者、早產(chǎn)兒和新生兒,手術(shù)創(chuàng)傷、嚴(yán)重?zé)齻?、氣管切開或插管、行靜脈導(dǎo)管和腹膜透析者,廣譜抗菌藥物或免疫抑制劑應(yīng)用者,免疫缺陷患者需要使用呼吸機(jī),其感染的風(fēng)險更大。根據(jù)感染部位不同和病情輕重不一,可引起呼吸道感染,創(chuàng)口感染、敗血癥等。在使用呼吸機(jī)者中,肺炎發(fā)生率約為3%~5%。

 

臨床上檢測不動桿菌主要是通過細(xì)菌培養(yǎng)。傳統(tǒng)分離方法在血平板和麥康凱平板上經(jīng)35℃~37℃培養(yǎng)18h~24h后,可形成圓形、灰白色、光滑、濕潤、邊緣整齊、直徑2~3mm的菌落,無色素形成,存在菌落與背景區(qū)分不明顯,不易分離等缺點,培養(yǎng)方法有尿液培養(yǎng)、痰液培養(yǎng)、咽部黏液培養(yǎng)等。當(dāng)尿培養(yǎng)陽性者細(xì)菌計數(shù)應(yīng)>10萬/毫升時,判定為不動桿菌感染;痰培養(yǎng)陽性者,每個平板的不動桿菌菌落數(shù)應(yīng)在30個以上。

 


 

HiMedia公司(微生物培養(yǎng)基生產(chǎn)商)生產(chǎn)的HiCrome™不動桿菌顯色培養(yǎng)基(貨號M1938)用于環(huán)境和臨床樣本中選擇性分離耐藥的不動桿菌,方便快捷,顯色明顯。產(chǎn)品經(jīng)過歐盟體系認(rèn)證,可用于臨床診斷。其特殊蛋白胨提供了氮源、碳源化合物、氨基酸、維生素和其他對生物體重要的生長因子,氯化鈉可以保持滲透平衡,選擇性添加劑可以抑制革蘭氏陽性菌生長。培養(yǎng)基中的顯色混合物使目標(biāo)菌菌落呈淡紫色,伴有光暈。試驗證實,多重耐藥的鮑曼不動桿菌如ATCC BAA-1605均可被有效分離出來,而其他不耐藥的不動桿菌生長被抑制。ATCC BAA-1605菌株于2006年從加拿大醫(yī)院中分離,頭孢他啶、慶大霉素、替卡西林、哌拉西林、環(huán)丙沙星等多種抗生素均有耐藥性。

 

HiCrome™不動桿菌顯色培養(yǎng)基在配置過程中,無須高壓滅菌,在冷卻至45-50°C需加入兩管復(fù)溶的MDR選擇性添加劑(貨號FD271,成分氨芐青霉素鈉鹽和頭孢他啶)或Leeds不動桿菌選擇性添加劑(貨號FD335)。只需在35-37°C培養(yǎng)24h~48h即可得到結(jié)果。該產(chǎn)品有多篇引用文獻(xiàn),如2017年發(fā)表的印度錫金的轉(zhuǎn)診醫(yī)院對鮑曼不動桿菌分離株β-內(nèi)酰胺酶的表型分析(Uzma Rehman , Karma Gurmey Dolma , T.Shantikumar Singh. Comparative analysis of various phenotypic methods for the detection of beta-lactamase in Acinetobacter baumannii isolates from a referral hospital in Sikkim, India[J]. Indian Journal of Basic and Applied Medical Research,2017, 6(3) : 226-233)。