支原體DNA抽提Kit的操作方法
更新時(shí)間:2022-10-25 | 點(diǎn)擊率:754
支原體DNA抽提Kit有如下幾種情況。如細(xì)胞培養(yǎng)液中存在抑制PCR的物質(zhì),這時(shí)就需要提取。細(xì)胞培養(yǎng)基中的血清濃度如果超過12%,那么對(duì)下游的PCR反應(yīng)會(huì)產(chǎn)生抑制。酚紅,對(duì)熒光定量PCR的檢測也會(huì)干擾。這些均可以通過使用Miverva公司的支原體DNA提取試劑盒來克服。對(duì)于樣品類型是細(xì)胞團(tuán)、疫苗、凍存細(xì)胞和石蠟包埋的組織,也需要提前提取DNA。另外,如果樣品中蛋白含量高于10mg/ml,則先需要用蛋白酶K進(jìn)行處理。
支原體DNA抽提Kit與細(xì)胞培養(yǎng)高度重合的培養(yǎng)條件,注定了支原體要與細(xì)胞共同競爭有限的生存資源。
早有研究表明,一些支原體(包括最為常見的人型支原體、發(fā)酵支原體、精氨酸支原體等),通過精氨酸脫亞胺酶分解精氨酸來供能。當(dāng)這些支原體混入細(xì)胞培養(yǎng)體系后,會(huì)與細(xì)胞爭搶精氨酸,導(dǎo)致細(xì)胞「吃不飽飯」,出現(xiàn)營養(yǎng)不良的癥狀:生長速率異常、活力下降、易脫壁等等。
如果你培養(yǎng)的細(xì)胞出現(xiàn)以下情況,基本可以確定是支原體感染了,不放心的話可以再配合支原體檢測試劑(檢測神器幫你揪出培養(yǎng)基中的支原體?。┻M(jìn)一步確認(rèn)。
支原體DNA抽提Kit細(xì)胞被支原體污染后的表現(xiàn)
1.細(xì)胞生長緩慢
2.細(xì)胞變形
3.培養(yǎng)基中碎片增加
4.細(xì)胞易聚團(tuán)
5.鏡下觀察有小黑點(diǎn)
6.培養(yǎng)基提前變色