配制細胞培養(yǎng)基(Cell Culture Medium)時,常使用胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)作為關鍵成分之一,因為它含有豐富的生長因子、蛋白質(zhì)和養(yǎng)分,對細胞的生長和繁殖非常有益。以下是配制細胞培養(yǎng)基時使用胎牛血清的一般步驟:
材料準備:
適當?shù)募毎囵B(yǎng)基基礎(例如,DMEM,RPMI-1640,MEM等)。
胎牛血清(FBS)。
雙抗溶液(選加)
步驟:
消毒操作: 在無菌工作臺下,確保所有用具和試劑都是無菌的,以防止細胞培養(yǎng)的污染。
血清選擇: 決定所需的FBS濃度。通常,FBS的最終濃度在培養(yǎng)基中約為5%至10%。要注意,不同類型的細胞可能需要不同的FBS濃度。一些特殊細胞培養(yǎng)可能需要更低的FBS濃度。
配制培養(yǎng)基: 將血清用三步法解凍,根據(jù)您所選擇的基礎培養(yǎng)基的要求,將FBS添加到基礎培養(yǎng)基中。通常,將FBS添加到基礎培養(yǎng)基的體積比例為5%至10%。
添加補充物: 根據(jù)您培養(yǎng)的細胞類型,可能需要添加額外的補充物,如非必要氨基酸、維生素、雙抗溶液等。確保按照相關實驗室方案或文獻中的建議添加這些成分。
混勻: 使輕柔混勻,確保FBS和其他成分均勻分散在培養(yǎng)基中。
保存: 將培養(yǎng)基存儲在4°C的冰箱中,避免陽光直射,以延長其保存時間,盡量在1周內(nèi)用完。
請注意,不同類型的細胞可能需要不同的培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件,因此在開始實驗前,應仔細了解您正在培養(yǎng)的特定細胞類型的培養(yǎng)需求,并根據(jù)需要進行定制化的培養(yǎng)基配制。此外,細胞培養(yǎng)過程中的無菌操作非常重要,以防止細胞培養(yǎng)的污染。