胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)是在生物醫(yī)學(xué)研究和細(xì)胞培養(yǎng)中廣泛使用的重要生物制品,它含有豐富的生長(zhǎng)因子、蛋白質(zhì)和其他生物分子,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖起著至關(guān)重要的作用。制備胎牛血清是一個(gè)復(fù)雜的過程,通常由專業(yè)的生物制品公司進(jìn)行,以確保其質(zhì)量和純度。在本文中,我們將介紹一般的胎牛血清制備過程的主要步驟。
步驟1:采集胎牛血液
制備胎牛血清的第一步是采集胎牛的血液。這需要在專業(yè)場(chǎng)所進(jìn)行,確保采集的胎牛來自健康且受監(jiān)控的牧場(chǎng)。采集血液需要遵循倫理和動(dòng)物福利的法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)。確保供體是5-8月齡的牛胚胎。
步驟2:血液分離
采集的胎牛血液會(huì)經(jīng)過離心分離,將血漿與血細(xì)胞分開。血漿中包含了胎牛血清的大部分有利于細(xì)胞體外生長(zhǎng)和繁殖的營(yíng)養(yǎng)成分,如蛋白質(zhì)、生長(zhǎng)因子和激素。
步驟3:過濾和清理
分離后的血漿會(huì)經(jīng)過過濾等步驟,以去除殘留的細(xì)胞碎片和顆粒物。這有助于提高血清的質(zhì)量和純度,確保它不含有微生物或其他污染物。
步驟4:滅菌
胎牛血清需要進(jìn)行滅菌處理,以確保其中不含有微生物污染。常見的滅菌方法包括過濾、輻照(細(xì)胞治療專用)等,這些方法可以有效地殺滅細(xì)菌、病毒和其他微生物。
以Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清為例:將經(jīng)過初步檢測(cè)合格的很多供體胎牛的粗血清,混合在一起,在低溫條件下,經(jīng)七次加壓過濾,最后三次為0.1 µm無(wú)菌過濾處理,得到淺黃色,澄清,稍粘稠液體。同一批次血清質(zhì)量上基本無(wú)差異。不同廠家一個(gè)批次產(chǎn)量差異較大,從100升到2000升不等。批次大,更利于試驗(yàn)的穩(wěn)定和連續(xù)的可參照性。
步驟5:質(zhì)量控制
制備后的胎牛血清通常會(huì)經(jīng)過一系列的質(zhì)量控制測(cè)試,包括檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的兼容性、生長(zhǎng)因子和激素水平,以確保其質(zhì)量符合要求。這些測(cè)試有助于驗(yàn)證血清的質(zhì)量和生物活性。
步驟6:分裝和儲(chǔ)存
制備后的胎牛血清會(huì)被分裝到小瓶或小管中,并嚴(yán)格冷凍保存。這有助于防止血清中的成分降解或受到污染。儲(chǔ)存溫度通常為零下20攝氏度或更低,以確保血清的長(zhǎng)期保存穩(wěn)定性。
總之,制備胎牛血清是一個(gè)復(fù)雜的過程,需要專業(yè)的設(shè)備和技術(shù)。在實(shí)驗(yàn)室中,研究人員通常會(huì)從可靠的商業(yè)供應(yīng)商購(gòu)買胎牛血清,這些供應(yīng)商生產(chǎn)的胎牛血清符合嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),可以用于細(xì)胞培養(yǎng)和生物醫(yī)學(xué)研究。正確使用和存儲(chǔ)胎牛血清是確保實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵,因此研究人員應(yīng)遵循供應(yīng)商的建議和操作規(guī)程,以充分利用這一重要的生物制品。