真菌是一類具真核和細胞壁的異養(yǎng)生物。真菌可以通過孢子延續(xù)種群,典型的營養(yǎng)體為絲狀分支結(jié)構(gòu)??晌廴炯毎囵B(yǎng)基的真菌種類繁多,最常見的有曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。
與其他類型的污染相比,真菌污染的癥狀明顯不同且更易觀察。
在培養(yǎng)基中會形成淡黃色或白色的漂浮物,肉眼可見,較易被發(fā)現(xiàn);
短期內(nèi)培養(yǎng)液多不變混濁;
顯微鏡下可以看見細胞之間或是培養(yǎng)基中,有縱橫交錯穿行的絲狀,樹枝狀或管狀菌絲;
多數(shù)菌絲在高倍鏡下可以觀察到鏈狀排列的菌株,而念珠菌及酵母菌菌株呈卵圓形,散落在細胞上及細胞周邊生長。
真菌污染的鑒定,需要將待檢測的細胞培養(yǎng)基,接種在真菌專用培養(yǎng)基上進行鑒定,例如:馬丁培養(yǎng)基、沙氏培養(yǎng)基等。
與處理細菌污染的原則一致,細胞培養(yǎng)物一旦發(fā)生真菌污染,建議舍棄培養(yǎng)物。應盡快把污染細胞與其它細胞系隔離開,不要打開培養(yǎng)皿,以免孢子飛出;同時需要對實驗過程中所用的器材、試劑和操作空間做相應處理:消毒液噴灑、紫外線消毒、高溫滅菌等。
如果細胞不能被丟棄,需要進行除真菌處理,請注意:高濃度的抗生素或是抗菌素(兩性霉素 B 、泰樂菌素等)對細胞會產(chǎn)生一定毒性,在使用前可以進行劑量反應實驗確定影響。
因此,發(fā)生真菌污染,盡量丟棄培養(yǎng)環(huán)境中的全部細胞。