炎熱的暑假已經(jīng)過去,新的學(xué)年已經(jīng)開始!每年的開學(xué)季,對(duì)于生物相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室而言,是十分重要的時(shí)刻。新學(xué)期,標(biāo)志著一個(gè)嶄新的開始,一次學(xué)術(shù)成長(zhǎng)的機(jī)會(huì)。在開學(xué)前,進(jìn)行充分的準(zhǔn)備工作,可以確保實(shí)驗(yàn)室的順利運(yùn)行,為學(xué)生提供一個(gè)安全、有序的學(xué)習(xí)環(huán)境。
我們盤點(diǎn)了生物實(shí)驗(yàn)室中,開學(xué)前的常見準(zhǔn)備工作,希望可以為各位小伙伴帶來一些幫助。
一、實(shí)驗(yàn)材料和試劑準(zhǔn)備
檢查實(shí)驗(yàn)材料、試劑和實(shí)驗(yàn)用品的庫存。確保所有實(shí)驗(yàn)需要的材料都齊全,并且沒有過期。對(duì)于有限耗材,及早準(zhǔn)備并制定合理的分配計(jì)劃,以免在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行時(shí)出現(xiàn)材料不足的情況。
在選擇細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中用到的試劑及耗材時(shí),在條件允許情況下,盡量選用無菌級(jí)別的產(chǎn)品,降低污染發(fā)生的概率,同時(shí)免去滅菌的步驟,節(jié)約寶貴的實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)和生物制藥等領(lǐng)域中常用且重要的組成部分,但其組分復(fù)雜且尚不明確,其質(zhì)量直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。在挑選高品質(zhì)的牛血清時(shí),需經(jīng)過謹(jǐn)慎的考慮和選擇,以確保實(shí)驗(yàn)的成功和可靠性。
細(xì)胞培養(yǎng)中所用到的牛血清,含有多種蛋白質(zhì),以及細(xì)胞生長(zhǎng)所需要生長(zhǎng)因子、激素、貼附因子和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。雖然有不少無血清成分、血清替代物成分等一系列琳瑯滿目的培養(yǎng)基出現(xiàn),但有數(shù)據(jù)表明,牛血清依舊是細(xì)胞培養(yǎng)的“金標(biāo)準(zhǔn)"。
由于牛的發(fā)育程度不同,所以在不同時(shí)間點(diǎn)采血,牛血液中所含的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)也不同。通常胎牛血清營(yíng)養(yǎng)成分豐富,隨著牛發(fā)育至后期,各類生長(zhǎng)因子等物質(zhì)逐漸消失,血清中抗體、補(bǔ)體等蛋白質(zhì)含量升高。
因此,在挑選牛血清的時(shí)候,應(yīng)根據(jù)所培養(yǎng)的細(xì)胞狀況、所進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)類型按需挑選,盡量減少浪費(fèi)或營(yíng)養(yǎng)不足的情況出現(xiàn)。
不論哪種牛血清,每一批次出廠前,都要經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測(cè)。以胎牛血清為例,重點(diǎn)應(yīng)包括但不限于以下幾項(xiàng):
1、內(nèi)毒素含量檢測(cè)
內(nèi)毒素含量≤10EU/ml。
內(nèi)毒素含量過高,會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。國(guó)際上規(guī)定,內(nèi)毒素水平的高低是胎牛血清的級(jí)別判定的標(biāo)準(zhǔn)之一。
2、病原檢測(cè)
特級(jí)胎牛血清還要經(jīng)過嚴(yán)格的病原檢測(cè),包括無菌檢測(cè)和病毒檢測(cè),確保血清無污染。
無菌檢測(cè)項(xiàng)目包括厭氧菌、好氧菌、真菌(最容易污染細(xì)胞的酵母菌和霉菌都應(yīng)包括在內(nèi))以及支原體檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果應(yīng)全部為陰性,視為通過無菌檢測(cè)。
病毒檢測(cè)項(xiàng)目包括一些曾在世界大范圍爆發(fā)、人畜共患或是十分常見的病毒身上。每個(gè)地區(qū)的法規(guī)會(huì)有些許區(qū)別,但牛副流感3型病毒(PI-3)、牛腹瀉病毒(BVD)、牛細(xì)小病毒等是任何國(guó)家和地區(qū)的檢測(cè)報(bào)告中,都應(yīng)標(biāo)注清楚的。一批合格的血清,病毒檢測(cè)項(xiàng)目均應(yīng)為陰性。
需要注意的是,還應(yīng)對(duì)BVD-1、BVD-2的抗體進(jìn)行檢測(cè),確保血源沒有感染過BVD。
3、各類蛋白檢測(cè)
血紅蛋白含量小于20mg/dL;
總蛋白含量在30-50g/L;
白蛋白含量在14-34g/L;
α、β、γ球蛋白含量則以實(shí)際測(cè)量為準(zhǔn);
IgG應(yīng)小于250μg/mL
Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清,作為一個(gè)科研喜愛且信賴的品牌。除了滿足上述一些基本的指標(biāo)外,Ausbian還有一些其他優(yōu)勢(shì)。
低內(nèi)毒素:<3EU/ml;
全程冷鏈運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融;
每年按廠家生產(chǎn)順序,會(huì)有多批次平行供應(yīng),每個(gè)實(shí)驗(yàn)室專屬批號(hào)管理,保證供貨穩(wěn)定;
每個(gè)批次產(chǎn)量800-2000升,穩(wěn)定供應(yīng);
新批次在試用前,提供試用服務(wù)。
二、設(shè)備檢查和維護(hù)
確保實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的設(shè)備和儀器處于良好的工作狀態(tài),定期維護(hù)、保養(yǎng),保障儀器的準(zhǔn)確性和可靠性。
三、清潔和消毒:
實(shí)驗(yàn)室的清潔和消毒,是保障實(shí)驗(yàn)環(huán)境衛(wèi)生的關(guān)鍵步驟。在開學(xué)前,對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)、工作區(qū)域、水槽、設(shè)備表面等進(jìn)行清潔和消毒。特別是細(xì)菌培養(yǎng)室、細(xì)胞培養(yǎng)室,這類對(duì)環(huán)境潔凈度要求比較高的空間,建議進(jìn)行嚴(yán)格的清潔和消毒,以防止交叉污染。
傳統(tǒng)的甲醛熏蒸耗時(shí)耗力,對(duì)細(xì)胞有毒性;酒精消毒對(duì)部分支原體又不起作用。因此,推薦使用德國(guó)Minerva Biolabs。廣譜便捷,不僅對(duì)支原體有作用,也可祛除并預(yù)防其他細(xì)菌、真菌、病毒等微生物污染。