一般來說,動物疫苗的制作,需要用到血清。以豬為例,通過用豬血請?zhí)娲Q?,降低物種特異性的影響。Ausbian豬血清,常用于豬肺炎支原體疫苗。在對細胞和活疫苗進行支原體檢驗中,《獸藥典》也明確推薦了豬血清作為支原體檢驗用液體培養(yǎng)基的組成成分。
DNA免疫是一種免疫治療方法,也被稱為DNA疫苗或基因疫苗。它是利用人工合成的DNA片段來誘導(dǎo)機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答的一種策略。與傳統(tǒng)的疫苗不同,DNA免疫不是直接引入已死亡或減毒的病原體,而是將包含特定抗原信息的DNA序列導(dǎo)入機體,以促使機體自身產(chǎn)生與之相關(guān)的免疫應(yīng)答。
DNA免疫制備抗體是一種基于DNA免疫的技術(shù),旨在通過向動物皮下,皮間,肌肉,脾臟等部位注入含有編碼特定抗原的DNA序列的載體,激發(fā)機體產(chǎn)生特異性抗體,利用下游技術(shù)檢測,分離純化這些特異性抗體。
20世紀90年代初,核酸免疫被提出,為疫苗接種領(lǐng)域開辟了一條充滿希望的新途徑。最常見的核酸疫苗是基于DNA質(zhì)粒的,它們基于一個簡單而聰明的原理:細胞在體內(nèi)攝取DNA并在細胞內(nèi)表達編碼蛋白的能力,該編碼蛋白將作為抗原(Ag)。反過來,免疫系統(tǒng)可以識別上述外來抗原并對其進行特異性免疫反應(yīng)。為了獲得編碼蛋白的最佳表達,將基因結(jié)構(gòu)置于哺乳動物啟動子的控制下,通常是驅(qū)動高基因表達的人巨細胞病毒(CMV)啟動子。
DNA疫苗可以通過多種方式接種,其中肌肉注射和皮內(nèi)接種是常見的兩種方法。在前者質(zhì)粒主要被肌肉細胞吸收,后者接受質(zhì)粒的細胞是真皮細胞,其中包括朗格漢斯細胞(在皮膚中發(fā)現(xiàn)的組織駐留抗原呈遞細胞)。與免疫途徑無關(guān),DNA免疫的成功依賴于專業(yè)ag呈遞細胞(APCs)對DNA和/或質(zhì)粒編碼抗原的最終攝取。
DNA疫苗有很多優(yōu)點,其中比較突出的有點就是安全性。基本不必擔(dān)心殘留毒力,這是減毒疫苗的主要問題。
此外,DNA疫苗已被證明能夠誘導(dǎo)抗體和細胞反應(yīng)。細胞反應(yīng)是對抗細胞內(nèi)病原體的關(guān)鍵,與滅活疫苗相比,DNA疫苗誘導(dǎo)細胞反應(yīng)的潛力是主要優(yōu)勢之一。此外,由于存在未甲基化的CpG基序,DNA質(zhì)粒具有內(nèi)在的佐劑特性,已被描述為快速觸發(fā)先天免疫反應(yīng)。最后,DNA疫苗可以很容易地按需設(shè)計。
因此,一方面,我們有可能根據(jù)所使用的DNA結(jié)構(gòu)調(diào)節(jié)引起的免疫反應(yīng),迫使誘導(dǎo)抗體或細胞反應(yīng),或兩者兼而有之。另一方面,與所有其他下一代疫苗一樣,僅使用少數(shù)抗原而不是使用整個病原體進行免疫,有助于開發(fā)DIVA疫苗(可將受感染動物與接種疫苗的動物區(qū)分開來的疫苗),這是獸醫(yī)學(xué)中的一個基本概念。無論如何,與基于蛋白質(zhì)的亞基疫苗相比,DNA疫苗的優(yōu)勢在于生產(chǎn)成本更低,并且它們具有更高的儲存和運輸穩(wěn)定性。DNA疫苗接種已在嚙齒動物模型中成功發(fā)展,但在其他動物中獲得的結(jié)果顯示是矛盾的。有一些商業(yè)DNA疫苗可用于魚類,效果好,也可用于馬。
然而,對大型動物DNA疫苗接種產(chǎn)生的主要懷疑之一在于其低免疫原性,有時歸因于體內(nèi)DNA轉(zhuǎn)染效率低。提高DNA在體內(nèi)傳遞效率有希望的方法是利用體內(nèi)電穿孔。其他提高DNA轉(zhuǎn)染效率的方法,如生物或納米顆粒,也被提出。除了用于增強DNA攝取的方法外,研究還提供了許多其他策略來改善誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)和提供的保護。不過,必須記住,設(shè)計合理的DNA疫苗的第一步是確定有希望的抗原,這在處理復(fù)雜病原體時并不那么明顯。我們的經(jīng)驗遠非提供一種單一的普遍疫苗接種戰(zhàn)略,而是表明,疫苗應(yīng)針對目標動物物種和要對付的病原體進行調(diào)整。