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血清說明書——儲(chǔ)存、解凍、使用方法

更新時(shí)間:2023-07-14  |  點(diǎn)擊率:750

一、血清的儲(chǔ)存


1、長期儲(chǔ)存:

血清在生產(chǎn)制備完成后,通過質(zhì)量檢測,然后被運(yùn)送至市場上銷售。整個(gè)過程中,包括運(yùn)輸流程,儲(chǔ)存溫度應(yīng)嚴(yán)格保證在-20℃,避免反復(fù)凍融影響血清活性。

實(shí)驗(yàn)人員在收到血清,檢查完好后,及時(shí)將血清送至-20℃冰箱中儲(chǔ)存,用時(shí)再取出采用三步法解凍。

在未解凍的情況下,血清可長期儲(chǔ)存在在-20℃或-80℃環(huán)境中,只要是在保質(zhì)期內(nèi),均能正常使用。

儲(chǔ)存過程中,需要定期監(jiān)控儲(chǔ)存血清的冰箱中,溫度是否符合規(guī)定,保證冰箱制冷效果(-20℃)是否正常,盡量避免出現(xiàn)溫度大幅度的波動(dòng)的情況,防止血清因溫度變化而反復(fù)凍融的情況出現(xiàn)。

另外,盡量將血清獨(dú)立存放于一定區(qū)域(恒溫區(qū)域),避免反復(fù)開關(guān)冰箱門對(duì)儲(chǔ)存溫度造成影響。


2、在4℃冰箱中的儲(chǔ)存:

解凍后的血清,不宜在4℃冰箱中放置過久。

血清在生產(chǎn)加工運(yùn)輸過程中,沒有添加外源抗菌成分。因此開封后,如果長期保存在使用頻率高且潔凈度差的4℃冰箱中,很容易染菌。

如果配制為培養(yǎng)基,添加了雙抗,可以在一定程度上減少培養(yǎng)基污染的風(fēng)險(xiǎn),但是由于基礎(chǔ)培養(yǎng)基的添加,使得整體成分更為復(fù)雜,保存不當(dāng)則會(huì)使有效物質(zhì)活性降低。

因此,我們建議,添加了血清的培養(yǎng)基盡量做到現(xiàn)配現(xiàn)用;解凍后的血清不要長期儲(chǔ)存在4℃冰箱中,盡可能不要超過7天。


二、血清的解凍

當(dāng)血清需要被解凍時(shí),我們不建議大家把剛從-20℃中拿出的冰凍血清,直接放入4℃冰箱中過夜融化,也不要在室溫進(jìn)行過夜解凍。

由于血清含有蛋白質(zhì)等干物質(zhì),這類物質(zhì)容易先融化析出,水這類溶劑后融化,導(dǎo)致血清產(chǎn)生沉淀,影響使用效果。

因此,要盡可能保證所有成分同步融化,因此我們建議使用三步法融化,具體步驟見下表。

需要注意的是,如果血清是儲(chǔ)存在-80℃冰箱中,三步法解凍前,應(yīng)先將血清轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中存放1-2天。

一次解凍后,分裝至無菌離心管中,盡量保證每管是一次的用量,分裝管解凍也遵循三步法,解凍后需全部用完。




三、血清的使用

1、血清的熱滅活:

血清進(jìn)行熱滅活的目的是,利用較高的溫度使補(bǔ)體失活。由于胎牛血清會(huì)嚴(yán)格控制采血時(shí)間為5-8月齡的胎牛,此時(shí)還未形成完整的補(bǔ)體系統(tǒng),因此,合格的胎牛血清,是不需要滅活的。

但是實(shí)驗(yàn)中如果需要新生牛血清、小牛血清、豬血清或馬血清這些血清時(shí),則需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求而定。

根據(jù)血清廠家多年來總結(jié)的經(jīng)驗(yàn),常規(guī)解凍后,40℃水浴加熱20分鐘即可,能夠盡可能地保留營養(yǎng)成分。

2、細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用:

對(duì)于新的細(xì)胞系或從無血清培養(yǎng)轉(zhuǎn)變到胎牛血清培養(yǎng)的細(xì)胞系,需要進(jìn)行適應(yīng)期。在初始適應(yīng)期,可以將血清濃度逐漸降低,直到細(xì)胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)為止。

3、關(guān)注血清的批次:

相同品牌的胎牛血清,在蛋白質(zhì)含量等方面,可能會(huì)存在批次差異,因此在同一實(shí)驗(yàn)中最好使用來自同一批次的血清,以減少變異性。如果不得不使用不同批次的胎牛血清,請(qǐng)進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)以確保結(jié)果的可重復(fù)性。




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