細(xì)胞培養(yǎng)是一類常用的生物學(xué)研究技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)對實驗試劑及實驗器具依賴程度比較高,實驗試劑品質(zhì)的高低,一定程度上決定了實驗結(jié)果的穩(wěn)定性好壞,本期內(nèi)容,盤點細(xì)胞實驗中常見的一些試劑。
血清:
血清是蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、生長因子、激素和其他支持細(xì)胞生長和存活的小分子的混合物。在細(xì)胞培養(yǎng)中,血清通常被添加到培養(yǎng)基中,以提供細(xì)胞生長和增殖所必需的營養(yǎng)和生長因子的來源。血清還可以提供其他好處,如緩沖能力,滲透壓調(diào)節(jié)和細(xì)胞粘附。
細(xì)胞培養(yǎng)中常用的血清是胎牛血清(FBS),它是從5-8月齡牛胚胎的血液中分離過濾,收集得到的。FBS含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子,可以支持細(xì)胞生長和增殖,并被廣泛用于細(xì)胞培養(yǎng)。其他類型的血清,如小牛血清或馬血清,也可根據(jù)具體的細(xì)胞類型和實驗條件使用。
選擇選擇品質(zhì)、級別較高的胎牛血清,有利于細(xì)胞實驗的穩(wěn)定。Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清,澳洲血源,內(nèi)毒素含量低,并且可以做到多平行供應(yīng),滿足各類實驗需求。
培養(yǎng)基:
培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵組成部分,它提供了細(xì)胞生存和生長所需的必要液體環(huán)境。培養(yǎng)基通常是鹽、氨基酸、維生素、糖等其他營養(yǎng)物質(zhì)的液體混合物大多數(shù)培養(yǎng)基中也含有酚紅這類無害的指示成分,也可能含有血清、激素和生長因子。
培養(yǎng)基的組成可以根據(jù)培養(yǎng)的特定細(xì)胞類型和實驗條件而變化。例如,不同的細(xì)胞類型可能有不同的營養(yǎng)需求或生長因子依賴性,并且可能需要不同的培養(yǎng)基配方。此外,一些細(xì)胞可能需要專門的培養(yǎng)基配方來誘導(dǎo)分化或維持特定的表型。
對于干細(xì)胞培養(yǎng)而言,培養(yǎng)基的優(yōu)化更為復(fù)雜。選擇一款無需大量優(yōu)化,便捷且高效的干細(xì)胞培養(yǎng)基也是十分重要的一點。
Ausbian干細(xì)胞專用培養(yǎng)基,是在含微量胎牛血清的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,通過添加一種人永生化干細(xì)胞系的條件培養(yǎng)基混合組成,是一款即用型培養(yǎng)基。
經(jīng)技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,通過多輪實驗驗證,可維持包括人成體干細(xì)胞質(zhì)干細(xì)胞、人間充質(zhì)干細(xì)胞等各種類型干細(xì)胞良好的增殖速率,與其他干細(xì)胞培養(yǎng)相比,使用Ausbian干細(xì)胞專用培養(yǎng)基的細(xì)胞,可傳代次數(shù)更多、狀態(tài)更穩(wěn)定。
胰酶:
胰蛋白酶是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的一種酶,用于從培養(yǎng)皿或燒瓶中分離細(xì)胞。細(xì)胞生長并附著在培養(yǎng)皿或燒瓶的表面,形成一層稱為單層的細(xì)胞。胰蛋白酶可以分解細(xì)胞外基質(zhì)中的蛋白質(zhì),這有助于使細(xì)胞松動并使其脫離表面。
然而,過度使用胰蛋白酶會對細(xì)胞產(chǎn)生負(fù)面影響,如改變細(xì)胞表面標(biāo)記物和降低細(xì)胞活力。因此,優(yōu)化胰蛋白酶化過程并盡量減少其使用以確保最佳的細(xì)胞培養(yǎng)條件是很重要的。
抗生素:
抗生素通常用于細(xì)胞培養(yǎng),以防止細(xì)菌、真菌和支原體污染。污染可能發(fā)生在處理或制備細(xì)胞培養(yǎng)物的過程中,或來自受污染的試劑或設(shè)備,并可能導(dǎo)致細(xì)胞活力喪失,細(xì)胞行為改變和實驗偽影。
將特定濃度的抗生素添加到培養(yǎng)基中,以提供針對污染微生物的選擇性壓力,同時盡可能地減少對所培養(yǎng)細(xì)胞的毒性作用。細(xì)胞培養(yǎng)中常用的抗生素是青霉素和鏈霉素,它們分別針對細(xì)菌細(xì)胞壁的合成和蛋白質(zhì)的合成。
除了防止污染,抗生素還可以對細(xì)胞行為產(chǎn)生其他影響。例如,一些研究表明抗生素可能通過與細(xì)胞信號通路或微生物群的相互作用影響細(xì)胞增殖、分化或凋亡。因此,必須仔細(xì)考慮在細(xì)胞培養(yǎng)中使用抗生素,并優(yōu)化其濃度和暴露時間,以盡量減少意外影響。
同樣重要的是要注意,抗生素并不是對所有類型的微生物都有效,也可能不足以防止所有類型的污染。因此,良好的無菌技術(shù)和定期的污染檢測對于維持高質(zhì)量的細(xì)胞培養(yǎng)也是很重要的。
德國Minerva Biolabs公司生產(chǎn)的支原體祛除試劑系列,針對實驗環(huán)境、培養(yǎng)箱和水浴鍋等液體環(huán)境都有相應(yīng)的祛除、預(yù)防試劑,定期使用,幫助實驗室維持潔凈。