培養(yǎng)原代細(xì)胞是一項(xiàng)復(fù)雜的工作,其關(guān)鍵點(diǎn)包括以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞類型選擇:不同類型的細(xì)胞需要不同的培養(yǎng)條件,因此首先需要明確要培養(yǎng)的細(xì)胞類型,例如動(dòng)物細(xì)胞、植物細(xì)胞等。
培養(yǎng)基的配制:培養(yǎng)基是細(xì)胞生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子的混合物,需要按照特定的配方制備。不同類型的細(xì)胞需要不同的培養(yǎng)基,因此需要根據(jù)細(xì)胞類型選擇適合的培養(yǎng)基,并嚴(yán)格按照配方制備。另外,血清也是一個(gè)重要因素。Ausbian進(jìn)口胎牛血清,內(nèi)毒素含量低,品質(zhì)穩(wěn)定。
細(xì)胞培養(yǎng)條件的控制:細(xì)胞需要特定的生理和環(huán)境條件才能生長和分裂。因此需要控制培養(yǎng)箱中的溫度、濕度、CO2濃度、通氣性等參數(shù),以及培養(yǎng)皿的密閉性和材料的選擇等因素,以提供適合的生長環(huán)境。
細(xì)胞的傳代:細(xì)胞在培養(yǎng)基中生長和分裂,逐漸形成細(xì)胞層。為了保持細(xì)胞的生長狀態(tài)和活性,需要及時(shí)將細(xì)胞移植到新的培養(yǎng)皿中進(jìn)行傳代,以維持細(xì)胞的生長和分裂。
消除細(xì)胞污染:在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞污染是常見的問題,如細(xì)菌、真菌、病毒等。因此需要采取適當(dāng)?shù)拇胧?,如滅菌、消毒、過濾等,以避免細(xì)胞污染對(duì)細(xì)胞生長和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。
胎牛血清,是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。其中不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子。