曾經(jīng)有學者做過統(tǒng)計,世界范圍內(nèi)的細胞培養(yǎng),細胞發(fā)生支原體污染的概率在70%以上。
支原體因其體積小,在普通光學顯微鏡下難以觀察;在自然界中存在廣泛;污染前期癥狀不明顯且對抗生素有抵抗等特點,往往令實驗人員束手無策。
1、支原體污染對于細胞本身以及細胞實驗的影響是多方面的。比較直接的影響就是細胞狀態(tài)不佳,生長速度慢,實驗無法推進。
2、細胞內(nèi)部的一些生理生化反應(yīng)也會因支原體污染而改變:細胞內(nèi)DNA、RNA及蛋白表達發(fā)生改變、細胞提前老化、加速細胞凋亡進程等,影響實驗結(jié)果,導致實驗數(shù)據(jù)不準確,時間、經(jīng)費的浪費。
3、對于其他實驗的影響:一株污染的細胞很有可能成為實驗室的污染源,對工作區(qū)域以及培養(yǎng)箱和液氮罐造成污染,進而污染其他細胞,導致其他細胞繼發(fā)性污染,實驗受影響,數(shù)據(jù)無法重復,預期結(jié)果出不來。
一般情況下,普通培養(yǎng)擴增的細胞,如果發(fā)現(xiàn)支原體污染,建議直接將被污染的細胞都丟掉,并將實驗培養(yǎng)環(huán)境進行消殺處理,防止支原體卷土重來。
對于已耗費很多時間、大量擴增起來的細胞,或經(jīng)過基因轉(zhuǎn)染、體外刺激等大量工作處理過的細胞,如果發(fā)現(xiàn)細胞被支原體污染了,又該怎么辦?
由于前期工作量巨大,實驗人員往往不愿意丟棄已有細胞,還想做“最后的掙扎",希望可以高效地清除細胞上的支原體污染,讓實驗得以往下推進,以最終獲得準確的實驗數(shù)據(jù)。
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