支原體(mycoplasma)是一種沒有細胞壁的最小原核細胞。在細胞培養(yǎng)過程中,支原體污染率達到60%以上,當細胞(特別是傳代細胞)被支原體污染后,細胞內的DNA、RNA及蛋白表達發(fā)生改變,污染嚴重時細胞生長緩慢,細胞形態(tài)發(fā)生改變,并出現(xiàn)細胞病變。因而細胞培養(yǎng)過程中,防止支原體污染是一個世界性的難題。
支原體污染細胞后很難察覺,同時若細胞培養(yǎng)過程受到了支原體污染,*清除支原體也是非常困難的。因此在細胞培養(yǎng)過程中,定期進行支原體檢測,在源頭上清除支原體污染,并做好支原體預防工作顯得尤為重要。
由于支原體直徑較小,經(jīng)常可以穿過實驗室常規(guī)的0.20微米孔徑的除菌濾膜,高壓過濾時,甚至可以穿過0.10微米孔徑的除菌濾膜,造成細胞的支原體污染。細胞培養(yǎng)的支原體污染來源主要有:(1)細胞之間的交叉污染,這是支原體污染的最主要原因;(2)細胞培養(yǎng)操作人員的口腔、皮膚等。(3)細胞培養(yǎng)用的組分,如血清、培養(yǎng)液等;
試驗臺、超凈臺、培養(yǎng)箱、液氮罐、移液器、門把手、電話等細胞培養(yǎng)環(huán)境被支原體污染,可引起細胞的污染。應定期對工作區(qū)域進行消毒。本文締一生物為您分析實驗室工作區(qū)域中支原體祛除的方法。
常用以下三種方法:
Mycoplasma OffTM是一款支原體噴霧劑,用于清除工作區(qū)域中的支原體。它起效快(10秒鐘即起效),安全無毒,對細胞不會產(chǎn)生不良影響,噴灑后,可再用干凈紙張擦拭即可。對于工作臺以及各種細胞操作的器具表面,均可使用。如果是需要避免沾染液體的電子設備,可使用Mycoplasma OffTM濕巾擦拭。
細胞孵箱、水浴鍋等有溫水的地方,也容易滋生支原體、細菌等。在循環(huán)水中倒入Water ShieldTM(1:200稀釋)即可有效地預防滋生,效果可持續(xù)1個月左右。
Mycoplasma OffTM對許多細菌、病毒也有預防和殺滅作用