細胞培養(yǎng)(cell culture)是指在體外模擬體內環(huán)境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養(yǎng)也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術。不論對于整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說,細胞培養(yǎng)都是一個必bu可少的過程,細胞培養(yǎng)本身就是細胞的大規(guī)模克隆。細胞培養(yǎng)技術可以由一個細胞經過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術必bu可少的環(huán)節(jié),而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。細胞培養(yǎng)技術是細胞生物學研究方法中重要和常用技術,通過細胞培養(yǎng)既可以獲得大量細胞,又可以借此研究細胞的信號轉導、細胞的合成代謝、細胞的生長增殖等。
1、科學研究:藥物研究開發(fā)與基礎研究
藥物研究與開發(fā):新藥篩選、疫苗
研究與開發(fā)、基因工程藥物研究與開發(fā)、細胞工程藥物研究與開發(fā)、單克隆抗體制備
基礎研究:藥物作用機理、基因功能、疾病發(fā)生機理
2、 生物制藥:疫苗生產、基因工程藥物生產、診斷用和藥用單克隆抗體生產、細胞工程藥物生產細胞培養(yǎng)基本條件
3、合適的細胞培養(yǎng)基合適的細胞培養(yǎng)基是體外細胞生長增殖的最重要的條件之一,培養(yǎng)基不僅提供細胞營養(yǎng)和促使細胞生長增殖的基礎物質,而且還提供培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。
細胞培養(yǎng)基的種類很多,按其來源分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基(目前使用的培養(yǎng)基絕大部分是合成培養(yǎng)基),按其物質狀態(tài)分為干粉培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類。干粉培養(yǎng)基需由實驗者自己配制并滅菌,液體培養(yǎng)基由專業(yè)商家提供,用戶可直接使用,非常方便。每種細胞都有其合適的培養(yǎng)基培養(yǎng)基:MEM、DMEM、 IMDM、 RPMI-1640、F12、F12K (具體細胞用什么培養(yǎng)基要以細胞說明書為準,每一種細胞的培養(yǎng)基都是不一樣的)。
液體培養(yǎng)基保存:
液體培養(yǎng)基保存: 4℃冰箱避光保存,實驗前放入 37℃預熱。未加血清液體培養(yǎng)基有效期為 12 個月。液體培養(yǎng)基中的 L- 谷氨酰胺會隨著儲存時間的延長而慢慢分解。如果細胞生長不良,可以再添加適量 L- 谷氨酰胺。
干粉培
養(yǎng)基保存:4℃冰箱避光保存,有效期 36 個月。
目前,市場上可提供干粉培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。干粉培養(yǎng)基需使用者自己配制并滅菌,其優(yōu)點是價格便宜。缺點是配制過程繁瑣,質量不易控制。液體培養(yǎng)基是由專業(yè)產家按標準規(guī)?;a,不僅質量得到保證,而且使用十分方便。
養(yǎng)細胞要用好血清!