每一個實驗新手們剛進實驗室操作細(xì)胞,都是緊張興奮又手忙腳亂,就從最基本的養(yǎng)細(xì)胞來說,大家剛開始一定覺得理論知識看起來很容易,但是,在實際情況中一般是這樣的——“到底怎么回事,細(xì)胞長不好/細(xì)胞又死了/又污染了......"
這時,如果有一份靠譜的細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗總結(jié),或許可以幫助你少走彎路,今天就為大家分享一下由我們實驗室總結(jié)的細(xì)胞培養(yǎng)過程中的知識總結(jié),讓你事半功倍。
首先,我們來看看,什么是細(xì)胞培養(yǎng):
細(xì)胞培養(yǎng)是指細(xì)胞在體外的培養(yǎng)技術(shù),即在無菌條件下,從機體中取出組織或細(xì)胞,模擬機體內(nèi)正常生理狀態(tài)下生存的基本條件,讓它在培養(yǎng)皿中繼續(xù)生存、生長和繁殖的方法。通過細(xì)胞培養(yǎng)我們可以獲得大量的、性狀相同的細(xì)胞,以便于研究細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及功能和機制。
細(xì)胞真的很脆弱,就像小嬰兒一樣,需要你無微不至的關(guān)懷。
培養(yǎng)細(xì)胞之前,你需要做好這些準(zhǔn)備:
1、耗材的處理、
玻璃器皿的清洗,對于玻璃器皿(細(xì)胞瓶、裝營養(yǎng)液的瓶子、小青霉素瓶等)要用洗衣粉刷干凈(注意死角),然后沖干凈。用酸液浸泡 24 h 以上,之后用清水沖洗數(shù)遍,除去殘留酸液。瓶子之類,沖洗過程要使勁搖晃。
2、試劑的配置
試劑配置,細(xì)胞培養(yǎng)用的液體一般使用雙蒸以上的水即可。并注意 pH 值的調(diào)節(jié)。
3、無菌檢驗
無菌檢驗,主要采用過濾除菌:如胰酶、抗生素、G-418 溶液、各類培養(yǎng)基、丙酮酸鈉、谷氨酰胺等。有些可以采用高壓滅菌:如 PBS、D-Hank's等。
不同細(xì)胞對培養(yǎng)基的要求是不同的,要根據(jù)自己的細(xì)胞要求使用。
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