說起細胞培養(yǎng)用的血清,大多數人都會想到胎牛血清、新生牛血清,對于馬血清卻知之甚少。今天就給大家介紹一下血清中“低調的高手"——馬血清。
一、馬血清作用
細胞培養(yǎng)級的馬血清,經過多次過濾,去除了許多大分子蛋白,但保留了血清中促細胞生長的活性因子,表現出與胎牛血清和牛血清的類似的特性,因而能用于細胞培養(yǎng)。
馬血清可以刺激成纖維細胞分化,以及細胞外基質 (ECM) 、細胞因子的合成。另外培養(yǎng)神經細胞和心肌細胞、誘導生成樹突狀細胞等實驗均可用馬血清替代胎牛血清。
因此,馬血清通常適用于那些研究有絲分裂后,細胞關于生長因子和激素等問題的實驗?;蛟S,我們可以這樣說,從現有研究來看,馬血清更適合用來研究特定種類細胞的分化。
實際實驗應用方面:馬血清已被用作腦皮質神經元-膠質細胞培養(yǎng)的一種必添加物;大鼠的 PC12 細胞,在培養(yǎng)過程中,也需要在基礎培養(yǎng)基中添加馬血清作為補充劑。
1. 馬血清可用于細胞培養(yǎng)和干細胞的誘導分化,例如:
(1)RPMI-1640培養(yǎng)液加馬血清培養(yǎng)臍帶血單個核細胞。
(參考文獻:李春莉, 王建偉, 姜蓉, et al. 人參總皂苷誘導紅系血細胞增殖的信號轉導[J]. 中國組織工程研究, 2009(23):4568-4572.)
(2)原代培養(yǎng)神經細胞。有人用含10%馬血清的DMEM,分離培養(yǎng)BALB/c小鼠原代腦神經細胞。發(fā)現和添加2%神經細胞生長劑B27的Neurobasal培養(yǎng)基相比,含10%馬血清的DMEM培養(yǎng)基更節(jié)省成本,方便廉價。
(參考文獻:李丹, 呂耀中, 王微,等. 兩種培養(yǎng)基分離培養(yǎng)BALB/c小鼠原代神經細胞方法的比較[C]// 中國北方實驗動物科技年會. 遼寧省實驗動物學會, 2015.)
(3)誘導脂肪干細胞向成肌細胞分化
(文獻來源:劉杰,傅強.馬血清在脂肪干細胞成肌誘導中的作用[J].中國組織工程研究, 15(14))
(4)培養(yǎng)骨髓基質細胞。與胎牛血清相比,馬血清對小鼠骨髓基質細胞的促增殖作用更好。
(文獻來源:王改琴. 當歸多糖對小鼠骨髓基質細胞黏附分子表達及其黏附功能的影響[D]. 學位論文.重慶醫(yī)科大學, 2008.)
(5)添加20%馬血清的L-DMEM培養(yǎng)液可誘導人骨髓間充質干細胞分化為脂肪細胞。
(文獻來源:趙文靜,陳亞潔,劉薇.人骨髓間充質干細胞分離培養(yǎng)及生物學特性研究.中國現代醫(yī)學雜志.2006.16(18):2744-2747)
2. 馬血清添加到微生物培養(yǎng)基中,可用于培養(yǎng)微生物,如:
(1)馬血清添加到培養(yǎng)基中用于支原體的培養(yǎng)。在《獸藥典》中,含馬血清的支原體培養(yǎng)基被用于獸用疫苗的支原體檢查。用KM2培養(yǎng)基(含馬血清)還可培養(yǎng)豬肺炎支原體。
(文獻來源:胡茂志 焦新安,等.豬肺炎霉形體單克隆抗體的制備與鑒定.《中國獸醫(yī)科技》 2004年12期)
(2)馬血清加入到固體和液體培養(yǎng)基中,可用于培養(yǎng)幽門螺桿菌。并且,和羊血清和牛血清比較,添加馬血清的培養(yǎng)基更易于分裝和保存。
(文獻來源:劉琳娜, 丁士剛, 張靜,等. 幾種培養(yǎng)幽門螺桿菌方法的比較[J]. 胃腸病學, 2012, 017(004):240-241.)
3. 馬血清及激素可共同誘導建立家兔股骨頭缺血壞死的模型。
(文獻來源:洪嵩, 張?zhí)旌? 非創(chuàng)傷性股骨頭壞死模型的血液流變學及脂質代謝[C]// 2009第一屆貴州骨科論壇.)
二、注意事項
與胎牛血清一樣,馬血清在使用過程中也應注意幾個原則:
1、避免反復凍融;
2、三步法解凍,及時分裝;
3、配制好的*培養(yǎng)基在4℃儲存不要超過7天。
還有一個大家比較關心的問題,馬血清是否需要滅活?
我們都知道,胎牛血清由于特殊的采血時間(5-8月胎齡),牛胚胎體內還沒有形成完整的補體系統(tǒng),因而不需要采用熱滅活的手段對補體進行滅活。
而馬血清,在沒有特殊說明的情況下,一般采自成年馬匹。作為脊椎動物,成年馬也擁有完整的補體系統(tǒng)。
因而,如果所進行的實驗中,涉及補體相關內容,建議大家在使用前對馬血清進行熱滅活,也可以直接購買商品化的滅活馬血清。一些比較成功的實驗案例中,所用到的馬血清,也是經過熱滅活的。
Ausbian馬血清為細胞培養(yǎng)級。它來自健康馬血液,為封閉系統(tǒng)內無菌采血過濾而成,為淡黃色澄清液體,超低內毒素,無溶血,無異物,無細菌、真菌、支原體、噬菌體等。
產品描述
1、每個批次均具有完整的檢測報告,其中含有下列檢測:
1)理化檢查
包括外觀、pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、內毒素、蛋白顆粒度等
2)無菌檢查
含細菌真菌檢查、支原體檢查、噬菌體檢查,確保不含這些外源因子。
3)病毒檢查
牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)為陰性。
2、極低內毒素。
3、提供試用,養(yǎng)細胞更安心。