培養(yǎng)細(xì)胞為病毒的增殖提供了場所。
細(xì)胞是分離病毒最好和zui方便的基質(zhì),體外培養(yǎng)的細(xì)胞存在以下特點:
無抗體;不受到非特異拮抗物質(zhì)的影響;對病毒的敏感性比體內(nèi)細(xì)胞為高。
利用細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行病毒定性和定量,測定50%組織培養(yǎng)感染量(50%tissue culture infectious dose,F(xiàn)CID5o);
用于病毒感染及防治方面的研究:在制備減毒活疫苗和診斷用抗原時,細(xì)胞是病毒增殖的場所。
科學(xué)家指出:細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是伴隨著病毒學(xué)的發(fā)展而發(fā)展起來的。
采用離心感染法或提取病毒核酸進(jìn)行感染,細(xì)胞打孔器協(xié)助感染可擴(kuò)大病毒感染的宿主范圍;
病毒感染指標(biāo)易觀察,光鏡下可見細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopathic effect,cPE)、包涵體、細(xì)胞融合、血細(xì)胞吸附等現(xiàn)象,同時也便于用分子病毒學(xué)技術(shù)進(jìn)行檢測。
(二)細(xì)胞生物學(xué)
單個細(xì)胞克隆便于對細(xì)胞生物學(xué)的基礎(chǔ)理論進(jìn)行研究,如形態(tài)、結(jié)構(gòu)、細(xì)胞器及其功能、遺傳物質(zhì)、核型、變異、細(xì)胞轉(zhuǎn)化、生長周期等。
離體培養(yǎng)細(xì)胞便于進(jìn)行環(huán)境因素、藥物等單因素及多因素影響的研究,探索作用機(jī)制。
當(dāng)今細(xì)胞生物學(xué)研究的熱點
通訊和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、增殖與細(xì)胞周期的調(diào)控、生長和分化、衰老和死亡以及干細(xì)胞的應(yīng)用研究和細(xì)胞工程是以培養(yǎng)細(xì)胞學(xué)為基礎(chǔ),以細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)為手段和工具。
(三)細(xì)胞工程學(xué)
利用細(xì)胞融合及雜交技術(shù),進(jìn)行細(xì)胞工程的研究與開發(fā)。如生物反應(yīng)器的開發(fā)研究,將編碼某生物活性物質(zhì)的基因?qū)雱游锸芫眩瑥倪@種受精卵發(fā)育的動物組織、體液分泌物中獲得外源基因的表達(dá)產(chǎn)物。
(四)干細(xì)胞的培養(yǎng)
機(jī)體最原始細(xì)胞,具有較強(qiáng)的再生能力,在一定條件下可分化、增殖出各類細(xì)胞。
干細(xì)胞的數(shù)量極少,故需分離、保存并在體外大量培養(yǎng),長成各種組織和器官。主要集中在造血干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞和神經(jīng)干細(xì)胞上,已成為干細(xì)胞研究的首要課題。
(五)淋巴細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用
在培養(yǎng)環(huán)境中,淋巴細(xì)胞受某些生長因子的刺激,出現(xiàn)旺盛的分裂、增殖。淋巴細(xì)胞培養(yǎng)的成功對反映機(jī)體免疫功能狀況起很大作用,如研究細(xì)胞標(biāo)記,檢測T、B細(xì)胞數(shù)量及功能,檢測T細(xì)胞亞群(CD3、CD8、CD4.等細(xì)胞)的變化。
(六)遺傳性疾病的產(chǎn)前檢查
羊膜穿刺術(shù)獲得羊水中的胎兒細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),在妊娠早期診斷胎兒是否患有先天性遺傳病。
少量胎兒脫落細(xì)胞是能分裂的,經(jīng)2—4周生長,形成顯著單層上皮樣細(xì)胞,可按常規(guī)制備染色體。
檢測甲胎蛋白(alpha—fetoprotein,AFP)等,產(chǎn)前檢測出幾十種代謝病與遺傳病,較準(zhǔn)確地指導(dǎo)優(yōu)生優(yōu)育。
(七)毒性實驗及生物實驗的工具
培養(yǎng)細(xì)胞學(xué)對化學(xué)物質(zhì)、放射線、激素、藥物等提供了最簡易而又可靠的方法,并對毒性機(jī)制研究提供了良好的實驗對象。對腫瘤細(xì)胞進(jìn)行抗癌藥物的藥敏測試,以指導(dǎo)臨床抗癌藥物的使用及配伍。
(八)在現(xiàn)代生物技術(shù)中應(yīng)用
基因分離、基因測序與表達(dá)、基因轉(zhuǎn)移與重組、癌基因研究等。
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