血清是細胞培養(yǎng)過程中常用的生物試劑,市面上有很多種類的血清,今天就來給大家介紹其中的一款——透析胎牛血清。
透析胎牛血清是采用透析的方法,過濾去除10KDa以下的小分子(如氨基酸、核苷:次黃piao呤和胸腺核苷等、膽固醇等),而保留血清中的大分子成分,因而可用于一些特定的細胞實驗,比如:需要避免細胞培養(yǎng)基中一些小分子干擾的實驗。
那么,透析胎牛血清具體適用于實驗中有哪些常見場景?我們來詳細講講。
一、實驗過程中需要標記氨基酸
使用放射性標記小分子,對生物合成過程進行監(jiān)測,以研究蛋白質等大分子的生化性質、合成、加工、細胞內(nèi)傳送、分泌和降解過程。這時,常將細胞放在含有充足養(yǎng)分和放射性標記氨基酸(如35S標記的蛋氨酸或半胱氨酸)的培養(yǎng)液中進行標記。
為避免外源未標記的氨基酸的干擾,這時所用的血清就是透析胎牛血清,不含蛋氨酸和半胱氨酸,基礎培養(yǎng)基也要求不含蛋氨酸和半胱氨酸。
這種方法常見于生化代謝調(diào)控與疾病的機理研究。其他常見標記物包括14C標記的絲氨酸、亮氨酸、纈氨酸或32P標記的焦磷酸,這時培養(yǎng)液中的基礎培養(yǎng)基和胎牛血清都要求不含有這種小分子。
二、穩(wěn)定轉染的細胞株的篩選
另一種需要用到透析胎牛血清的情況是穩(wěn)定轉染的細胞株的篩選。
最常見的基因工程用細胞株是二氫葉酸還原酶缺陷型(DHFR-)的CHO細胞。
CHO(DHFR-)細胞由于不含DHFR,因而只能在含有胸苷、甘氨酸和次黃piao呤的培養(yǎng)基中才能生長。若將DHFR基因導入這種缺陷型細胞,則細胞能在不含這三種分子的培養(yǎng)液中生長。同時,加入氨甲喋呤(MTX)可刺激DHFR基因大量表達,與之一同轉染的外源基因就能大量表達,因而可以獲得人們所需的基因工程藥物。類似的情況也見于雜交瘤細胞的篩選。
這時的胎牛血清由于不含有次黃piao呤和胸腺嘧啶等,也常作為選擇培養(yǎng)基的一部分,參與陽性轉染細胞克隆的篩選。
基因調(diào)控的研究
采用報告基因檢測系統(tǒng)(常見熒光素酶作為報告基因)進行基因調(diào)控的研究時,為避免特定外源小分子(如激素等)作為基因激動劑的干擾,即需要透析胎牛血清來培養(yǎng)基因轉染后的細胞。
Ausbian透析胎牛血清
Ausbian透析胎牛血清:
透析過濾去除10000D以下小分子(如次黃piao呤和胸腺核苷),避免外源小分子對細胞產(chǎn)生干擾。
適合脈沖示蹤實驗(例如同位素標記特定小分子,并加入到培養(yǎng)體系中,以研究細胞代謝),也適合轉染CHO后的篩選等應用。
全程冷鏈運輸,避免血清反復凍融給實驗帶來影響;
內(nèi)毒素極低:<3EU/ml;
每個批次提供完整的檢測報告。