干酪乳桿菌葉酸測定用培養(yǎng)基原理及測定菌種介紹
更新時間:2020-12-09 | 點(diǎn)擊率:645
干酪乳桿菌葉酸測定用培養(yǎng)基采用干酪乳桿菌(ATCC7469)為測定用菌,用于葉酸的微生物法測定。它是基于Flynn等人(1)的配方,并經(jīng)Baker等人(2)和Waters、Mollin(3)改良。用于維生素測定的測定菌通常需要三種培養(yǎng)基:維持培養(yǎng)基、接種培養(yǎng)基和測定用培養(yǎng)基。
葉酸的檢測方法有許多種,主要根據(jù)測定試樣來決定其測定方法。若測定葉酸藥劑或制品中的葉酸含量,通??刹捎酶邏阂合嗌V法、比色法、熒光分析法、紫外分光光度法以及薄層層析法等。若測定食品或植物中的游離葉酸,一般都采用微生物測定法。
常用的檢測葉酸的干酪乳桿菌葉酸測定用培養(yǎng)基菌株有鼠李糖乳桿菌ATCC7469、糞鏈球菌以前被稱為ATCC8043、啤酒小球菌ATCC8081。此3種微生物對不同形式葉酸的敏感度不同。糞鏈球菌只對非甲基化葉酸敏感,如葉酸(PteGlu)、二氫葉酸(DHF)和四氫葉酸(THF),可用于鑒別分析各種形式葉酸在不同檢測物中的分布。啤酒小球菌對甲基化葉酸也不敏感。鼠李糖乳桿菌對單谷氨酸葉酸、含2或3個谷氨酸葉酸及其還原型衍生物均敏感,是3種微生物中反應(yīng)譜帶寬的一種,也是常用的菌種。
各種微生物生長需要有一些微量的專一生長因子,它們可能是維生素或氨基酸等。根據(jù)這種需求性為基礎(chǔ),設(shè)計(jì)出各種生長因子的定量法,選擇那些以必需定量的營養(yǎng)物為必需生長因子的菌株,制備好*不含該營養(yǎng)物的定量培養(yǎng)基,再分別在干酪乳桿菌葉酸測定用培養(yǎng)基上加入標(biāo)準(zhǔn)營養(yǎng)物和待測樣品,并定量地接種菌株進(jìn)行培養(yǎng)。然后根據(jù)微生物生長隨營養(yǎng)物加入量的不同而變化的情況,就可以對樣品中的營養(yǎng)物進(jìn)行定量。定量的方法有比濁法、酸度滴定法(試管法)、瓊脂平板擴(kuò)散法和質(zhì)量法等。