維生素B12,是人體必需維生素,在維持機體正常造血和神經(jīng)功能健全中起到至關重要的作用。因此,對于嬰幼兒配方乳品和營養(yǎng)補充食品中,測定維生素B12十分必要。
我國《GB 5413.14—2010食品安全國家標準 嬰幼兒食品和乳品中維生素B12的測定》規(guī)定了采用萊士曼氏乳酸桿菌(ATCC 7830)測定維生素B12的整個流程。實際亦有多篇報道,肯定了微生物法的準確可靠,并且測定樣品還包括腸內營養(yǎng)粉劑、多維元素片、維生素飲料以及含乳飲料等[1-4]。
微生物法的原理是,根據(jù)試驗菌株對微生物B12的特異性和靈敏性,在含有除維生素B12以外所有營養(yǎng)的【測定培養(yǎng)基】中,加入標準曲線工作液以及未知待測樣品溶液,根據(jù)微生物生長產(chǎn)生的透光率,對待測樣本中微量的微生物B12進行測定。
其中,測量的準確度尤其依賴于維生素B12在一定濃度范圍內與透光率呈現(xiàn)良好的線性關系。而是否呈良好的線性,又與所用的【測定培養(yǎng)基】有很大的關系。有機構采用了不同品牌的【維生素B12測定培養(yǎng)基】進行測定,發(fā)現(xiàn)兩個國產(chǎn)品牌培養(yǎng)基的接種空白依然有生長,勉強可獲得標準曲線,但線性結果不理解。而進口品牌的“標準曲線明顯梯度正生長, 獲得較理想的標準曲線, 線性結果較理想”[5]。
參考文獻
1. 蔣孟虹,許蘋,秦峰,劉浩,楊美成. 微生物法測定腸內營養(yǎng)粉劑中微量維生素B12的含量[J].食品安全質量檢測學報,2016,7(3):893-897
2. 盧京光,裴琳,楊龍華.在線微生物濁度法測定多維元素片中微量維生素B12的含量[J].藥物分析雜志,2011,031(009):1837-1839
3. 陳亞波,周敏,楊彤.微生物法測定維生素飲料中的維生素B12[J].浙江農(nóng)業(yè)科學,2013,000(007):863-865
4. 林耀文,佘之蘊,李姣,蘇妙儀,范安妮,張施敬,王力清.微生物法測定含乳飲料中維生素B12含量[J].飲料工業(yè),2013,016(004):39-42
5. 陳緒華, 劉健, 江一飛. 不同測定培養(yǎng)基對維生素B12線性的影響[J]. 生物技術世界, 2013(04):53+131
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生產(chǎn)工藝均通過WHO-GMP、ISO9001、ISO13485認證,
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產(chǎn)品信息
中文:維生素B12測定用培養(yǎng)基
英文:Vitamin B12 Assay Medium
品牌:HiMedia®
規(guī)格:100G/瓶
貨號:M036
儲存溫度:8℃下密閉保存,理想是放置于干燥器中。
質控
該產(chǎn)品出廠前經(jīng)廠家嚴格檢測,確保合格后方予放行。具體質控包括:
外觀(粉末顏色、均一度、是否結塊)
溶水后的培養(yǎng)基顏色和透明度
pH值(8.5% 水溶液,25℃)
培養(yǎng)反應(對萊士曼乳酸桿菌ATCC 7830 在35-37℃培養(yǎng)18-24小時)
生長試驗(用美國藥典維生素B12標準品,每管分別加入0.0,0.025,0.050,0.075,0.1,0.125,0.150和0.2ng,觀察菌株的連續(xù)生長狀況,在620nm測定吸光度)
(注:分別為對照,空白,標準品1,標準品3,標準品5)
優(yōu)勢
該產(chǎn)品不含痕量維生素B12,有效避免標準曲線偏移和本底過高,結果準確可靠。