透析胎牛血清適合脈沖示蹤實(shí)驗(yàn)(同位素標(biāo)記研究細(xì)胞代謝)適合轉(zhuǎn)染CHO后的篩選,避免外源小分子對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生干擾。本文締一生物為您分析透析胎牛血清的生產(chǎn)工藝。
a. 透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎(chǔ)上進(jìn)行加工的。
胎牛血清在無(wú)菌條件下要經(jīng)過(guò)0.1微米膜三重過(guò)濾,要進(jìn)行一系列的檢測(cè),包括理化性質(zhì)檢查(如滲透壓和pH值),成分檢查(如內(nèi)毒素和血紅蛋白)、外源因子檢查(如細(xì)菌、病毒和支原體)以及促進(jìn)細(xì)胞增殖的檢查等。
透析胎牛血清為保證其性能和安全性,也需具備胎牛血清的這些工藝和檢查。
b. 透析胎牛血清,顧名思義,需經(jīng)過(guò)透析。它是在4°C下用特定的透析膜對(duì)血清在0.15M NaCl中透析。由于該透析膜只允許10 kDa以下的小分子穿過(guò),在滲透壓的作用下,這些小分子便從血清中滲析到透析膜外的NaCl溶液中。10 kDa以下的小分子有化學(xué)小分子、核苷酸、某些激素、鹽、低分子量蛋白質(zhì)、氨基酸、細(xì)胞因子、葡萄糖、殘留抗生素和其他外源分子。那么透析的效果如何?以及透析到何時(shí)呢?由于不可能監(jiān)測(cè)全部小分子,因此常選用葡萄糖為代表。血清中葡萄糖<5 mg/dL,即可以停止透析了。透析過(guò)程中,除監(jiān)測(cè)葡萄糖濃度外(可采用葡萄糖氧化酶方法測(cè)定),還需仔細(xì)監(jiān)測(cè)pH值和滲透壓。
c. 該透析采用的是切向流過(guò)濾(tangential flow filtration)。切向流是指液體流動(dòng)方向與過(guò)濾方向呈垂直方向的過(guò)濾形式。該方式使液體流動(dòng)在濾膜表面產(chǎn)生剪切力,減小了濾膜上的物質(zhì)堆積,保證了穩(wěn)定的過(guò)濾速度。
綜上所述,您是不是已經(jīng)對(duì)透析胎牛血清的生產(chǎn)工藝,有所了解。如果還有其他疑問(wèn),請(qǐng)咨詢締一生物/締一生物資深專家。