胎牛血清在培養(yǎng)細(xì)胞中,重要的是利用它的活性的因子,因此,融化過程中大限度地保留因子的活性,就變得非常重要。本文締一生物為您詳細(xì)解讀胎牛血清的三步融化法。
回憶一下,細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),要保持細(xì)胞的活性,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢?快融!血清同樣如此!三步法需要兩個(gè)半小時(shí),4℃過夜需要大約10個(gè)小時(shí)(冰箱一般設(shè)2-8℃,所以各實(shí)驗(yàn)室融化時(shí)間會稍有出入)。哪個(gè)速度對保留活性更好?不言而喻!
下面,我們詳細(xì)解讀『血清的三步融化法』的步驟:
圖:剛從-28℃拿出的血清,是這個(gè)樣子的
融化血清一步
溫度:室溫
時(shí)間:100ml - 35分鐘
500ml - 90分鐘
1000ml - 100分鐘
或
溫度:15-20℃水?。ㄐ陆拥淖詠硭?4℃上下)
時(shí)間:100ml - 5分鐘
500ml - 18分鐘
1000ml - 20分鐘
圖:這是近Ausbian血清的大區(qū)經(jīng)理,在天津血研所實(shí)驗(yàn)室拍到的——實(shí)驗(yàn)人員三步法化血清的圖片,為了節(jié)約時(shí)間,實(shí)驗(yàn)人員采取的是一步20℃水浴18min的方法。(用現(xiàn)接的自來水放入冰凍的血清,即可達(dá)到20℃水浴的效果。一般實(shí)驗(yàn)室沒有能制冷到20℃的水浴鍋)
融化血清第二步
溫度:20℃水浴(新接的自來水24℃上下)
時(shí)間:100ml - 15分鐘
500ml - 25分鐘
1000ml - 30分鐘
圖:第二步,仍舊是新接的自來水浴,25min
融化血清第三步
溫度:37℃水浴
時(shí)間:100ml - 20分鐘
500ml - 35分鐘
1000ml - 45分鐘
第三步,將血清置于37℃水浴鍋中進(jìn)行融化,大約30nmin左右,血清就*融化,可以分裝了。
圖:大家看,使用三步法融化的血清十分清亮,養(yǎng)細(xì)胞的效果也是棒棒噠。
綜上所述,您是不是已經(jīng)對胎牛血清的三步融化法,有所了解。如果還有其他疑問,請咨詢締一生物/締一生物資深專家。