新生牛血清是生物制品生產(chǎn)用的重要原材料,也極易污染其它各種外源因子。加強(qiáng)新生牛血清的質(zhì)量控制,對(duì)于提高病毒性疫苗生產(chǎn)的穩(wěn)定性和安全性具有重要意義。
對(duì)于病毒性外源因子的檢測(cè)方法通常為
體內(nèi)試驗(yàn),采用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,如乳鼠,小鼠,雞胚等;
體外試驗(yàn),如細(xì)胞培養(yǎng)等;
種屬特異性病毒的檢定,如針對(duì)具體病毒屬的基因序列特征采用 RT-PCR 方法和基因測(cè)序技術(shù)等;
逆轉(zhuǎn)錄病毒的檢測(cè),如逆轉(zhuǎn)錄酶檢測(cè)(PERT);
電鏡;
免疫熒光的方法。
生物制品的安全性,始終是企業(yè)和管理機(jī)構(gòu)關(guān)注的重點(diǎn),尤其是病毒因子。病毒個(gè)體小,危害大。如上世紀(jì) 60 年代在脊髓灰質(zhì)炎疫苗中檢測(cè)到 SV40 病毒,在減毒黃熱活疫苗中發(fā)現(xiàn)禽白血病病毒, 2010 年 Merck 公司已上市的部分批次輪狀病毒疫苗中檢測(cè)到豬圓環(huán)病毒核酸序列。自我國(guó)生物制品實(shí)施 GMP 以來(lái),外源因子通過(guò)這一途徑污染的機(jī)率已大大減少。
動(dòng)物法,一般為取備檢樣品對(duì)小鼠及乳鼠進(jìn)行腦腔及腹腔注射,然后觀察病、死等感染情況。雞胚則采用尿囊腔接種。豚鼠用于檢查細(xì)胞內(nèi)結(jié)核分支桿菌,家兔主要用于檢測(cè)猴來(lái)源細(xì)胞中是否存在B病毒(猴皰疹病毒)污染。
細(xì)胞培養(yǎng)法主要是采用細(xì)胞病變?cè)囼?yàn)和血吸附試驗(yàn)。血吸附實(shí)驗(yàn)則是利用某些病毒能夠特異性吸附豚鼠及禽的紅細(xì)胞特點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè),將待檢品接種于培養(yǎng)的細(xì)胞,之后將0.2%-0.5%的雞和豚鼠紅細(xì)胞加在不同時(shí)間段培養(yǎng)細(xì)胞上,顯微鏡觀察紅細(xì)胞吸附情況,若有吸附現(xiàn)象則說(shuō)明檢品里面有某種病毒性外源因子的存在。
以上兩種方法的優(yōu)勢(shì)是能反映出外源因子的活性,不足之處是不能知道是何種外源因子。在這方面,核酸檢測(cè)法是一個(gè)很好的補(bǔ)充,本文就先不進(jìn)行討論了。
品名:Ausbian精制新生牛血清
貨號(hào):VS500N
批號(hào):1712A
規(guī)格:500ml/瓶
市場(chǎng)價(jià):1600元
歡樂(lè)價(jià):800元
*活動(dòng):買10瓶送3瓶,100瓶送40瓶
上海締一生物生物科技有限公司提供的澳洲進(jìn)口Ausbian精制新生牛血清(γ照射)系新西蘭血源(來(lái)自新西蘭政府獸醫(yī)管理局監(jiān)管下的具有出口注冊(cè)證的正規(guī)屠宰場(chǎng)),GMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)。血清經(jīng)過(guò)0.22微米過(guò)濾和15kGy的gamma射線照射,無(wú)細(xì)菌支原體風(fēng)險(xiǎn),可殺病毒,經(jīng)檢測(cè)無(wú)BVD(牛病毒性腹瀉病毒)、PI-3(牛副流感病毒3型)和IBR(牛傳染性鼻氣管炎),可放心使用。
參考文獻(xiàn)
曹守春,董關(guān)木,王軍志. 生物制品中外源因子檢測(cè)現(xiàn)狀及進(jìn)展. 《2012年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十二屆中國(guó)藥師周論文集》2012年