支原體PCR檢測實驗操作樣品的收集
更新時間:2017-11-17 | 點擊率:1476
支原體PCR檢測實驗操作樣品的收集
支原體PCR檢測實驗操作
PCR反應(yīng)的前期操作應(yīng)在無菌環(huán)境中進行。
?。?)樣品的收集:待測細胞用抗培養(yǎng)基培養(yǎng)7d,用無菌容器取上清液500ul,4℃保存待測。
(2)模板的制作:在無菌的條件下,取細胞培養(yǎng)上清100ul于一無菌的0.5ml塑料離心管內(nèi),蓋好蓋子,95℃水浴加熱5min。
?。?)打開蓋子,向管內(nèi)加StrataCleanresin10ul,蓋好蓋子,旋渦混懸器混合,離心5—10s,吸取上清至一新的塑料離心管中,模板制作完畢,4℃保存。
?。?)PCR反應(yīng):反應(yīng)體系zui適條件為:10mmol/lTris-HCL(pH8.38);50mmol/lHCL;1.5-2.5mmol/lMgCL2;200umol/ldNTP;2UDapDNA聚合酶??偡磻?yīng)體系為50ul,反應(yīng)用去離子水均需用12000uw/cm2紫外燈照射。
VenorGeM支原體污染檢測試劑盒(一步法)支原體PCR檢測試劑盒組成:
Mix干粉(引物、dNTP、熱啟動taq酶,內(nèi)控對照),重懸緩沖液,陽性對照DNA,Tris/EDTA緩沖液。
特點:
廣譜(包含常規(guī)26種支原體)
靈敏度高
特異性好
操作簡單
便捷(整個操作不到3小時)